紫外分光光度法測定翻白草中總黃酮的含量

摘要［目的］探討翻百草中總黃酮含量的測定方法.［方法］以硝酸鋁、亞硝酸鈉及氫氧化鈉為顯色劑，利用紫外分光光度計測定翻白草中總黃酮的含量.［結果］**佳檢測波長為510nm，蘆丁質量濃度在20～50mg/L范圍內時，吸收度與質量濃度呈良好的線性關系，回歸方程為y=7457x+0.000平均回收率為99.52%，RSD為23%.［結論］采用紫外分光光度法測定翻白草中總黃酮的含量簡便易行，結果穩定可靠.

關鍵詞黃酮類分光光度法紫外線植物藥用

ABSTRACT：OBJECTIVETostudyassaymethodoftotalflavacontentinPotentilladiscolorbunge.METHODSWithAlCl3NaNO2NaOHaschromogenicagent，totalflavacontentofPotentilladiscolorbungeisdeterminedbyultravioletspectrophotometry.RESULTSTheoptimaldetectivewavelengthwas510nm，andabsorbabilityandmassconcentrationwassatisfactorylinearrelationshipatthemassconcentrationofrutinwasin20～50mg/L.Theregressionequationwasy=7457x＋0.0009，andtheaveragerecoveryratewas99.52%andRSDwas23%.CONCLUSIONUsingultravioletspectrophotometrytodetecttotalflavacontentinPotentilladiscolorbungeissimple，accurate，andsensitive.

Keywords：flavones;spectrophotometry，altravionlet;plants，medicinal

翻白草為薔薇科植物的干燥全草，含鞣質，植株各部分均含黃酮類化合物［1］，具有降低血脂、抗菌、止瀉和增強免疫功能的作用［2］.本研究采用紫外分光光度法對翻白草中總黃酮的含量進行了測定，旨在為翻白草藥材及制劑的質量控制提供科學依據.

1材料

翻白草全草采集于吉林省龍井市銅佛寺鎮，經延邊大學藥學院生藥學教研室呂惠子副教授鑒定為正品翻白草；蘆丁對照品購自中G藥品生物制品檢定所.電子天平及753型紫外分光光度計均為上海精密科學儀器有限公司產品；REE52C型水浴鍋為北京市醫療設備總廠產品；旋轉薄膜蒸發器為上海亞榮生化儀器廠產品；202型電熱鼓風恒溫干燥箱為江蘇恒豐儀器廠產品.試劑均為AR級.

2方法與結果

1對照品溶液的制備精確稱取在105℃條件下干燥**恒定質量的蘆丁標準品10.0mg，置于100mL容量瓶中，加入700mL/L乙醇適量，微熱溶解，放冷后再加入700mL/L乙醇稀釋**刻度，搖勻，得質量濃度為0.10g/L的蘆丁對照品溶液，低溫保存，備用.

2供試品溶液的制備精確稱取翻白草100g，用700mL/L乙醇回流提取，回收溶劑得浸膏.將浸膏用適量水溶解，乙醚脫脂，置于冰箱中冷卻，有綠色沉淀產生，將過濾得到的濾液濃縮，干燥得到棕黃色粉末.準確稱取已于105℃條件下烘干**恒定質量的黃酮樣品20.0mg，用700mL/L乙醇定容**100mL.

3測定波長的選擇精確量取對照品溶液和供試品溶液各5mL，分別置于25mL容量瓶中，加入50g/L亞硝酸鈉溶液0mL，搖勻，放置6min，加入100g/L硝酸鋁溶液0mL，搖勻，放置6min，加入40g/L氫氧化鈉溶液10.0mL，再加入水**刻度，搖勻，放置15min，在波長為200～700nm范圍內掃描，結果2種溶液均在510nm處有**大吸收，其他成分對測定無干擾.
4標準曲線的繪制分別精確吸取蘆丁標準液0、0、0、0、0、0mL置于25mL容量瓶中，加入50g/L亞硝酸鈉溶液0mL，搖勻，放置6min，加入100g/L硝酸鋁溶液0mL，搖勻，放置6min，加入40g/L氫氧化鈉溶液10.0mL，加入700mL/L乙醇**刻度，搖勻，放置15min，進樣，于波長為510nm處測定吸收值.得回歸方程：y=7457x+0.000結果表明，測定蘆丁質量濃度在20～50mg/L范圍內呈良好的線性關系.

5精確度實驗取對照品溶液于510nm波優點測定吸收值5次.結果示平均吸收值為0.25RSD為0.54%，表明該方法精確度良好.

6穩定性試驗取供試品溶液，于0、30、60、90、120min時測定吸收值.結果表明，總黃酮與鋁離子形成的紅色絡合物在1h內穩定，RSD為21%.

7重現性試驗精確稱取藥材樣品0g，共5份，平行試驗，于510nm波優點測定吸收值，結果見RSD為03％.

8加樣回收率實驗精確稱取于105℃條件下干燥**恒定質量的蘆丁對照品100mg，置于100mL容量瓶中，以700mL/L乙醇溶解，稀釋**刻度，搖勻，得蘆丁貯備液.取已知總黃酮含量的5個批次的樣品各0.5g，置于100mL磨口錐形瓶中，加入上述蘆丁貯備液10mL，加入700mL/L乙醇30mL，搖勻，測定510nm波優點吸收值，按回歸方程進行計算處理，結果見平均加樣回收率為99.52%，RSD為23%

以蘆丁為對照品，以硝酸鋁、亞硝酸鈉及氫氧化鈉為顯色劑，利用紫外分光光度計對翻白草中總黃酮的含量進行測定的方法具有簡便易行及結果穩定可靠等優點，同時還可對單個黃酮成分進行分析測定.