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慢病毒的濃縮與純化——PEG-8000濃縮法

實驗試劑
1. NaCl
2. PEG8000
實驗設備
1. 高壓滅菌鍋
2. 0.45μm濾頭
3. 高速離心機
4. 低溫冰箱
實驗步驟
1. 5X PEG8000 NaCl配制稱取NaCl 8.766 g; PEG8000 50g溶解在200ml Milli-Q純水中;121攝氏度 30min 濕熱滅jue 30min;保存在4℃。
2. 使用0.45μm濾頭過濾慢病毒上清液;
3. 每30ml過濾后的病毒初始液,加入5X PEG-8000 NaCl母液7.5 ml;
4. 每20~30min混合一次,共進行3-5次;
5. 4度放置過夜;
6. 4度,4000 g,離心 20min;
7. 吸棄上清,靜置管子1~2分鐘,吸走殘余液體;
8. 加入適量的慢病毒溶解液溶解慢病毒沉淀;
9. 集中后的病毒懸液分裝成50 μl每份,保存在成品管中。用碎干冰速凍后儲存在-80 ℃。
 
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